Alkalihalobacillus marmarensis proteazının üçlü faz ayırma (TPP) tekniği ile saflaştırılarak enzimin su ile karışabilen mono alkoller yokluğunda/varlığında kinetik davranışının ve termodinamik stabilitesinin belirlenmesi. Yeni izolatın bazı ekstrasellüler enzimleri üretme yeteneğinin kalitatif olarak araştırılması


Kerimak Öner M. N. (Yürütücü)

TÜBİTAK Projesi, 2023 - 2024

  • Proje Türü: TÜBİTAK Projesi
  • Başlama Tarihi: Mayıs 2023
  • Bitiş Tarihi: Mayıs 2024

Proje Özeti

Sunulan projenin amaçları tip tür Alkalihalobacillus marmarensis proteazının organik çözücü stabilitesinin belirlenmesi, suşun ürettiği diğer bazı enzimlerin kalitatif olarak tayin edilmesi ve yeni proteazın bilimsel ortamda görünürlüğünün sağlanması şeklinde sıralanabilir. Enzim kültür üst sıvısından üçlü faz ayırma (TPP) yöntemi ile saflaştırılacaktır. Yöntemin değişkenleri saflaştırılacak olan proteaz enzimi özelinde optimize edildikten sonra yöntem saflaştırma amaçlı kullanılacaktır. Projede, Alkalihalobacillus marmarensis suşunun ürettiği ekstrasellüler alkalen proteaz enziminin organik çözücü yokluğunda/varlığında katalitik ve termodinamik performansının tayini yapılacaktır. Organik çözücü ortamında katalitik ve termodinamik parametrelerin belirlenmesi su ile karışabilen mono alkoller metanol, etanol, 1-propanol ve 2-propanol varlığında gerçekleştirilecektir. Öncelikle saflaştırılmış enzimin organik çözücü yokluğunda kinetik ve termodinamik parametreleri belirlenecektir. Ardından organik çözücülerin her birinin artan konsantrasyonlarında enzimin kinetik ve termodinamik parametreleri tayin edilecektir. Bu amaçla organik çözücü yokluğunda/varlığında enzimin optimum sıcaklık ve termal inaktivasyon kinetiği çalışmalarından elde edilen deneysel verilerden yararlanılacaktır. Projede aynı zamanda suşun üretme ihtimali olan ve ticari önem arz eden ekstrasellüler amilaz, selülaz, lipaz/esteraz ve pektinaz enzimlerini üretme yeteneği de kalitatif olarak tayin edilecektir. Adı geçen enzimlerin seçimi literatür bilgileri dahilinde yapılmış olup ticari önem arz eden enzimlerdir.