Mezenkimal Kök Hücre Eksozomlarında Protein Miktar Tayini Optimizasyonu


HALBUTOĞULLARI Z. S. (Yürütücü), YAZIR Y., GACAR G., MERT S., GÖKSEL ŞAHİN M., ÖZTÜRK A., et al.

Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje, 2022 - 2023

  • Proje Türü: Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje
  • Başlama Tarihi: Nisan 2022
  • Bitiş Tarihi: Aralık 2023

Proje Özeti

Eksozomlar, çeşitli biyolojik ve patolojik süreçlerde yer alan farklı bileşimlere sahip küçük hücre içi membran bazlı veziküllerdir. Tüm hücre türleri tarafından salgılanırlar ve kan, tükürük ve idrar dahil çoğu vücut sıvısında bulunabilirler. Eksozomlar çapı genellikle 30-150 nm olan; DNA, mRNA'lar, kodlanmayan RNA'lar, membran proteinleri ve sitozolik proteinleri içeren nanometre boyutlu mikroveziküllerdir. Mezenkimal kök hücrelerinde parakrin etkilerini eksozomlar aracılı olarak yapıldığı bilinmektedir. Yapılan son çalışmalarda da eksozomların hücresel terapilere yeni bir alternatif olarak önemli bir potansiyele sahip olduğunu göstermektedir. Eksozom izolasyonu sonrası protein miktar tayini yapılması gerekmektedir. Bu işlem kritik bir basamaktır çünkü sonraki in-vitro veya in-vivo çalışmaların temelini oluşturmaktadır. Uzun süren çok aşamalı ultrasantrifüj işlemlerinden sonra elde edilen protein miktarı az olmaktadır. Çalışmamızda kültür ortamında kültüre edilen Wharton-Jeli kaynaklı mezenkimal kök hücrelerden elde edilen eksozomlar RİPA buffer, Tris-Triton, Tris-SDS, ticari Mammalian Protein Extraction Reagent (M-PER) solusyonu kimyasalları ile muamele sonrası protein miktarındaki değişiklikler karşılaştırılacaktır.