Mezenkimal Kök Hücre Eksozomlarında Protein Miktar Tayini Optimizasyonu

HALBUTOĞULLARI Z. S. (Executive), YAZIR Y., GACAR G., MERT S., GÖKSEL ŞAHİN M., ÖZTÜRK A., et al.

Project Supported by Higher Education Institutions, BAP Infrastructure, 2022 - 2023

Project Type: Project Supported by Higher Education Institutions
Support Program: BAP Infrastructure
Begin Date: April 2022
End Date: December 2023

Project Abstract

Eksozomlar, çeşitli biyolojik ve patolojik süreçlerde yer alan farklı bileşimlere sahip küçük hücre içi membran bazlı veziküllerdir. Tüm hücre türleri tarafından salgılanırlar ve kan, tükürük ve idrar dahil çoğu vücut sıvısında bulunabilirler. Eksozomlar çapı genellikle 30-150 nm olan; DNA, mRNA'lar, kodlanmayan RNA'lar, membran proteinleri ve sitozolik proteinleri içeren nanometre boyutlu mikroveziküllerdir. Mezenkimal kök hücrelerinde parakrin etkilerini eksozomlar aracılı olarak yapıldığı bilinmektedir. Yapılan son çalışmalarda da eksozomların hücresel terapilere yeni bir alternatif olarak önemli bir potansiyele sahip olduğunu göstermektedir. Eksozom izolasyonu sonrası protein miktar tayini yapılması gerekmektedir. Bu işlem kritik bir basamaktır çünkü sonraki in-vitro veya in-vivo çalışmaların temelini oluşturmaktadır. Uzun süren çok aşamalı ultrasantrifüj işlemlerinden sonra elde edilen protein miktarı az olmaktadır. Çalışmamızda kültür ortamında kültüre edilen Wharton-Jeli kaynaklı mezenkimal kök hücrelerden elde edilen eksozomlar RİPA buffer, Tris-Triton, Tris-SDS, ticari Mammalian Protein Extraction Reagent (M-PER) solusyonu kimyasalları ile muamele sonrası protein miktarındaki değişiklikler karşılaştırılacaktır.