Mezenkimal kök hücrelerden pankreas adacık beta hücrelerine benzer insülin salgılayan hücrelerin rekombinant DNA teknolojisi ile eldesi
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Kocaeli Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2014
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: AYŞEGÜL BAĞLAR
Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): Gökhan Duruksu
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Sunulan tez çalışmasında mezenkimal kök hücreler kullanılarak gen aktarımı sonrası kimyasal uyarılma ile tip 1 diyabetin hücresel tedavisi için insülin üretebilen beta benzeri hücre elde etme potansiyelinin gözlenmesi amaçlanmıştır. Çalışmada sıçan pankreatik adacıklarından izole edilen mezenkimal kök hücreler (sPA-MKH) kullanılmıştır. İzole edilen pankreatik adacıklardan spesifik primerler kullanılarak Ngn3 (Neurogenin3), Pax4 (paired box gene 4), MafA (musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homolog A) ve Gck (Glucokinase) transkripsiyon faktörleri çoğaltılmış ve bu genlerden toplam dokuz grup oluşturularak sPA-MKH'lere elektroporasyon ile aktarılmıştır. Aktarılan genlerin birbirleriyle olan etkileşimleri ve gruplar arasındaki fark anlaşılmaya çalışılmıştır. Gen aktarımı sonrası hücreler kimyasal ajanlar ile endokrin yönde uyarılmış ve hücrelerin farklılaşma potansiyelleri morfolojik olarak ve beta hücre belirteçleri açısından gen ekspresyon profilleri karşılaştırılmıştır. Hücre içi proteinlerin sentezi arasındaki farkı belirleyebilmek için Western Blot Hibridizasyon yapılmıştır. Sonuç olarak gen aktarımı sonrası elde edilen gruplar arasında belirgin farklar olduğu ve yalnızca beta benzeri hücre değil diğer adacık hücrelerinin karakterini taşıyan hücrelerin de elde edildiği gözlenmiştir. Endokrin yönde kimyasal uyarılma sonucunda ise bazı gruplarda adacık benzeri hücre topluluklarının oluşmasını sağladığı görülürken, yalnızca Ngn3-Pax4-MafA genlerinin bir arada aktarıldığı grup hücreler üzerinde önemli bir etki yaratarak insülin granüllerine benzer yapı elde edildiği immünfloresan tekniklerle gösterilmiştir.