Prolaktin geni aktarılmış Mezenkimal Kök Hücrelerin uyarılmış kondrosit apoptozu üzerine engelleyici etkisinin in vitro araştırılması

---

Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Kocaeli Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2016

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: NİLBESTE BEKİROĞLU

Danışman: Gülçin Gacar

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Prolaktin Geni Aktarılmış Mezenkimal Kök Hücrelerin Uyarılmış Kondrosit Apoptozu Üzerine Engelleyici Etkisinin İn Vitro Araştırılması AMAÇ: Prolaktin (PRL) ön hipofiz bezinden ve diğer organlardan salgılanan antiapoptotik ve mitojenik özellik gösteren bir hormondur. Mezenkimal kök hücreler (MKH) de antiapoptotik özellik gösteren bir kök hücre grubudur. Osteoartrit ve römatoid artrit gibi hastalıklarda gerçekleşen kondrosit apoptozuna karşı MKH ve PRL kullanımını içeren klinik yaklaşımlar bulunmaktadır. Bu çalışmayla PRL geni aktarılmış MKH’ lerin (PKİ-MKH) kondrosit apoptozuna karşı etkisinin in vitro ortamda araştırılması ve ortak kültür yönteminin irdelenmesi hedeflenmiştir. YÖNTEM: PRL geni elektroporasyonla kemik iliğinden türetilmiş MKH’ lere aktarıldı. TNF-α, IL-1β ve IFN-γ’ dan oluşan bir apoptoz sinyali hazırlandı. 6 kuyucuklu kültür kaplarına kondrosit hücreleri (hCA), ayırıcı membranlara da MKH ve PKİ-MKH ekildi. Apoptoz sinyalleri ile birlikte 7 gün boyunca kültüre edildi. Kültürün 1. ve 7. günlerinde morfolojik gözlemler, ELISA ve BCA analizleri ile anneksin V analizi birlikte değerlendirildi. BULGULAR: Gen aktarımı sonunda hücrelerin kök hücre morfolojilerini ve koloni oluşturma potansiyellerini koruduğu gösterildi. Ortak kültür sonunda MKH ve PKİ-MKH grubu hücrelerde apoptotik cisimciklere rastlandı. Hücrelerdeki nekrozun ilk güne nazaran kontrol, MKH ve PKİ-MKH gruplarında sırasıyla 2,03, 3,5 ve 1,73 katına çıktığı tespit edildi. PKİ-MKH’ lerin metabolizmasının MKH’ lere göre artmış olduğu bulundu. SONUÇ: PKİ-MKH’ ler hem kök hücre özelliklerini hem de antiapoptotik özelliklerini korumuşlardır. PRL hücre ölümünü düzenleyerek hücreleri nekrozdan korudukları sonucuna varılmıştır. Ortak kültür koşullarının iyi tanımlanması ile bu hücrelerin in vitrodaki davranışları anlaşılabilir, daha sonra da in vivodaki kullanımları araştırılabilir. Hücreler ileride apoptoz çalışmalarında ve klinikte kullanılmaya aday hücrelerdir.

Anahtar kelimeler: kondrositler, mezenkimal kök hücreler, ortak kültür, apoptoz, gen aktarımı