Partial purification and characterization of polyphenol oxidase enzyme from common-morning glory (Ipomoea purpurea)

---

Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Kocaeli Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, BİYOLOJİ ANABİLİM DALI, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2021

Tezin Dili: İngilizce

Öğrenci: BEKTORE MANSUROV

Danışman: Yonca Yüzügüllü Karakuş

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Bu çalışmada, in vivo ve in vitro olarak yetiştirilen Ipomoea purpurea (I. purpurea) bitkilerinin polifenol oksidaz aktivitelerinin karşılaştırılması amaçlandı. Bu amaçla yerel bitki ile LS (Linsmaier & Skoog) ortamında in vitro büyütülen bitki yapraklarından ham ekstrakt örnekleri optimum koşullarda hazırlanarak polifenol oksidaz aktiviteleri açısından karşılaştırıldı. Buna göre, bitkisel ham ekstrakt örneklerinden in vitro olarak üretilen bitkiye ait yaprakların yerel bitki örneğine göre katekol substratına karşı daha yüksek polifenol oksidaz aktivitesine (yaklaşık 3 kat daha yüksek aktivite) sahip olduğu belirlendi. Daha sonra enzim, kültür bitkisinden Üçlü-Faz Ayırma (TPP) sistemi ile %57 aktivite geri kazanımı ile 10,5 kat saflaştırıldı. Enzim alt birimine ait moleküler ağırlığı SDS-PAGE ile yaklaşık 12.8 kDa olarak hesaplanırken enzim optimum pH ve sıcaklık değerleri sırasıyla 7,0 ve 30°C olarak belirlendi. Aktivite boyama sonrası kısmen saf enzimde lakkaz, peroksidaz ve katekol oksidaz aktiviteleri tespit edildi. Ayrıca, 20°C ile 40°C arasında enzim aktivitesinin ≥%75, pH 7,0 ile 9,0 arasında ≥%65 oranında korunduğu tespit edildi. Sonuç olarak I. purpurea bitkisinin bir polifenol oksidaz kaynağı olarak kullanılabileceği önerilmektedir.