Akademik Veri Yönetim Sistemi
XI. National Histology and Embryology Congress, Denizli, Türkiye, 16 - 19 Mayıs 2012, cilt.3, ss.98-99
P043 Sıçan beyninde immünoreaktif nöronal nitrik oksit sentetaz dağılımının incelenmesi Hakkı Dalçık1 , Yusufhan Yazır1 , Sema Kurnaz1 , Cannur Dalçık2 , Melda Yardımoğlu1
1Kocaeli Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Histoloji ve Embriyoloji Anabilim Dalı, Kocaeli 2Kocaeli Üniversitesi Tıp Fakültesi, Anatomi Anabilim Dalı, Kocaeli
Nitrik oksit (NO), üç farklı nitrik oksit sentetaz (NOS) izoformları olan ve arjininden sentezlenen gaz halinde bir nörotransmitterdir: nöronal NOS (nNOS), endoteliyal NOS (eNOS) ve uyarılabilir NOS (iNOS) olmak üzere. NO sistemi, muhtemel spesifik nörotransmitter sistemi üzerindeki etkisi aracılığıyla periferik ve merkezi düzeylerde, birçok davranıĢın kontrolünde rol oynar. Sıçanlarda, nNOS pozitif hücrelerin dağılımı, farklı yöntemlerle değiĢik beyin bölgelerinde gösterilmiĢtir. Bu çalıĢmada, kullandığımız monoklonal antikorla nNOS‘un fonksiyonlarının değerlendirilmesi için sıçan beyninde dağılımı incelendi. ÇalıĢmada, 200-250 g ağırlığında on eriĢkin erkek Wistar sıçanı kullanıldı. Kısaca, tüm hayvanlara, ketamin ile derin anestezi uygulandı ve heparinizasyonu takiben, %4 paraformaldehit içeren fosfat tamponlu tuz (PBS) ile transkardiyal olarak perfüze edildi. Beyinler çıkarıldı ve 3 saat boyunca aynı solüsyonda postfiksasyon uygulandı. 3μm kalınlığında beyin kesitleri alındı ve anti-nNOS monoklonal antikor kullanılarak bu kesitlere immünohistokimyasal prosedür uygulandı. ÇeĢitli beyin bölgelerinde nNOS immunoreaktif nöronlar ve lifler gözlendi. Genel olarak, nNOS immünreaktivitesi hücrenin hem sitoplazma hem de uzantılarında mevcuttu. Ġmmünopozitif yapılardaki boyanma yoğunluğu birbirinden farklıydı. Ġmmünoreaktif nöronların dağılımı, beyin bölgeleri boyunca değişiklik gösterdi. İmmünoreaktif nöronlar, hipotalamik (MPA, PVN, SON, Arc, VMH, BST), limbik (Hippokampus, MeA) ve kortikal bölgelerde gözlendi. Sıçan beynindeki nNOS immünoreaktivitesinin hücresel dağılımının gösterilmesi bazı anatomik alanlardaki NO‘in işlevi üzerine önemli bilgiler sunabileceği düĢünülmektedir. Ayrıca sunulan bu çalışmanın sonuçları sıçan beyninde nNOS araştırmaları için temel bir haritalama bilgisi oluşturacaktır.
Anahtar Kelimeler: Beyin, immünohistokimya, nöronal nitrik oksit sentetaz
The distribution of immunoreactive neuronal nitric oxide in the rat brain Hakkı Dalçık1 , Yusufhan Yazır1 , Sema Kurnaz1 , Cannur Dalçık2 , Melda Yardımoğlu1
1Department of Histology and Embriyology, School of Medicine, Kocaeli University, Kocaeli, Turkey 2Department of Anatomy, School of Medicine, Kocaeli University, Kocaeli, Turkey
Nitric oxide (NO) is a unique gasous neurotransmitter, synthesized from arginine by a family of three distinct
nitric oxide synthase (NOS) isoforms. Neuronal NOS (nNOS), inducible (iNOS) and endothelial (eNOS). The NO
system is implicated in the control of many behaviors, at peripheral and central levels, probably through its
action on specific neurotransmitter system. In the rat, using different methods the distribution of nNOS
positive cells has been detailed in various brain areas. In order to understand the functional aspects of nNOS
by using a monoclonal antibody, its distribution was evaluated in the rat brains.
Ten adult male Wistar rats weighing 200–250g were in the study. In brief-all animals were deeply
anesthetized with ketamine and transcardially perfused with heparinized saline followed by PBS containing 4%
PFA. The brains were removed and postfixed in the same solution for the next 3 h. 3μm thick brain sections
were cut and immunohistochemical procedure was performed to the brain sections using anti-nNOS
monoclonal antibody.
nNOS immunoreactive neurons and fibers were found throughout the brain areas. In general, nNOS
immunoreactivity was present in the cytoplasm and in the processes. The distribution of the intensity of the
immunostaining of the neurons differed between each other. The distribution of the immunoreactive neurons
varied throughout the brains areas. The immunoreactive neurons were located at hypothalamic (MPA, PVN,
SON, Arc, VMH, BST), limbic (Hipcampus, MeA), and cortical regions.
It is regarded that the presence of the cellular distribution of immunoreactive nNOS in the rat brain gives
important information on the functional aspects of the specific anatomical areas. In addition, the results of the
present study would provide a mapping information on the brain nNOS.
Keywords: Brain, immunohistochemistry, neuronal nitric oxide synthase